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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 20178-22
    蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展趨勢(shì)

    蛋白質(zhì)組一詞源于蛋白質(zhì)與基因組兩個(gè)詞的組合,意指“一種基因組所表達(dá)的全套蛋白質(zhì)”,即包括一種細(xì)胞乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)本質(zhì)上指的是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征,包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平,翻譯后的修飾,蛋白與蛋白相互作用等,由此獲得蛋白質(zhì)水平上的關(guān)于疾病發(fā)生,細(xì)胞代謝等過程的整體而的認(rèn)識(shí)。近兩年來(lái)蛋白質(zhì)組研究技術(shù)已被應(yīng)用到各種生命科學(xué)領(lǐng)域,如細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)等。在研究對(duì)象上,覆蓋了原核微生物、真核微生物、植物和動(dòng)物等范圍,涉及到各種重要的生物學(xué)現(xiàn)象,如信...

  • 20178-17
    免疫沉淀實(shí)驗(yàn)

    一、服務(wù)介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復(fù)合物從樣品中分離出來(lái),達(dá)到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進(jìn)行Westernblot分析。二、實(shí)驗(yàn)原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應(yīng)達(dá)到純化,定性檢測(cè)蛋白的目的,即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原(靶蛋白質(zhì))特異性結(jié)合的抗體,抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復(fù)合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復(fù)合...

  • 20178-16
    PAS染色法實(shí)驗(yàn)

    一、服務(wù)介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實(shí)驗(yàn)原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過...

  • 20178-10
    高質(zhì)量RNA提取條件之二

    1.選擇好的RNA分離方法現(xiàn)有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡(jiǎn)單也是安全的方法是柱式分離,如RNApure因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,時(shí)間短,純度高而受到大家的喜愛,RNApure不需要DNA酶消化DNA,節(jié)省了時(shí)間,避免RNA的降解,從而提高了產(chǎn)量;相對(duì)非柱式分離(如TRIZOL),去除蛋白及其他雜質(zhì)干凈,提高了純度,對(duì)于細(xì)胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質(zhì)、次生代謝物含量的影響,一般用TRIZOL提取純度不高,而且很...

  • 20178-9
    高質(zhì)量RNA提取條件之一

    1.迅速滅活內(nèi)源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個(gè)方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細(xì)胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結(jié)樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結(jié),以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無(wú)液氮RNA樣品儲(chǔ)存液中。它是一種水相、無(wú)毒的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護(hù)完整、未凍結(jié)的組織和細(xì)胞樣品中的RNA。關(guān)鍵要點(diǎn)是組織樣品切片要夠?。ǎ@樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...

  • 20178-8
    Elisa試劑盒試驗(yàn)過程中需要特別注意的細(xì)節(jié)

    Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。Elisa試劑盒試驗(yàn)過程中需要特別注意的細(xì)節(jié)1、試劑準(zhǔn)備:試劑都在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中使用一次性吸頭,避免交叉污染;2.加樣:加樣時(shí),...

  • 20178-3
    血清的保存方式

    血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):(1)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中需要長(zhǎng)期保存的血清儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預(yù)留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选#?)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體...

  • 20177-27
    結(jié)締組織類細(xì)胞培養(yǎng)

    一、成纖維細(xì)胞培養(yǎng)用人或動(dòng)物胚體為好;動(dòng)物可用小鼠或雞胚,去頭和內(nèi)臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養(yǎng);如為人胚,可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包皮是培養(yǎng)成纖維細(xì)胞的很好對(duì)象。二、巨噬細(xì)胞培養(yǎng)1.實(shí)驗(yàn)前三天,向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無(wú)菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi))。2.引頸殺死動(dòng)物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。3.置動(dòng)物于解剖臺(tái)上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè),暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,...

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